技術(shù)文章
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核酸作為一切分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ),其提取通常是開啟生物學(xué)研究的第一步,而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實驗成敗的關(guān)鍵因素之一。常見的核酸提取方法有酚氯仿抽提法、高鹽沉淀法、柱式法和磁珠法,其中,磁珠法核酸提取都分為哪幾個步驟?讓我們一起來看看吧!第一步:裂解核酸必須從細(xì)胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來,細(xì)胞裂解可通過機(jī)械作用、化學(xué)作用、酶作用等方法實現(xiàn)。其中,酶作用主要是通過加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白酶或鏈霉蛋白酶)以使細(xì)胞破裂,核酸釋放。蛋白酶還能降解與核酸結(jié)合的蛋...
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自1973年世界di一臺商用流式細(xì)胞儀問世以來,經(jīng)過近50年的發(fā)展流式細(xì)胞儀在結(jié)構(gòu)上發(fā)生了一系列的演變:由簡單到復(fù)雜、由單激光到多激光、由單色到多色、由分析到分選、從傳統(tǒng)流式到質(zhì)譜流式&光譜流式等。流式細(xì)胞儀分為哪些類別?讓我來帶你了解了解!1.分析型流式細(xì)胞儀用于快速分析檢測細(xì)胞組分及顆粒懸液,通過同時檢測分析液流中細(xì)胞上多種信號,對細(xì)胞加以細(xì)致的區(qū)分鑒別,目前臨床檢驗和科學(xué)研究主要使用此類流式細(xì)胞儀。2.分選型流式細(xì)胞儀用于快速分離獲取目的細(xì)胞,在分析檢測基礎(chǔ)上,通過分選...
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流式細(xì)胞術(shù)(FCM)是一種對處在快速流動中的細(xì)胞或其它生物微粒逐個進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體,按照細(xì)胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì),同時具有分析和分選細(xì)胞或生物顆粒的功能。流式細(xì)胞術(shù)在科研方面有哪些應(yīng)用?讓我們一起來看看吧!一、細(xì)胞凋亡檢測在正常細(xì)胞中,細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)位于胞漿側(cè)。細(xì)胞凋亡中期,PS外翻。AnnexinV是一種Ca2+依賴的對PS具有高度親和力的磷脂結(jié)合蛋...
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由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,一般在細(xì)胞受到污染早期或污染較輕時,能及時處理并除去污染物,部分細(xì)胞還有可能得到挽救。通常情況下,會有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細(xì)胞?一、霉菌污染污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn),短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲...
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原代培養(yǎng)是直接從生物體組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。腫瘤組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為腫瘤研究及治療提供充足的細(xì)胞來源是癌癥在體外研究的重要工具,與體內(nèi)研究相輔相成。但目前腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)成功率不高的許多問題還需繼續(xù)探討與研究。腫瘤組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些注意事項?讓我們一起來看看吧!注意點一:取材部位的選擇非常重要,應(yīng)在癌細(xì)胞集中、細(xì)胞活力較好的部位取材,盡量避免在壞死區(qū)取材;注意點二:取材后應(yīng)盡快培養(yǎng),最好不要超過24h,如需耽擱時間,可將組織塊于培養(yǎng)液中浸泡,放置...
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